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人ELISA試劑盒有哪些操作技巧呢?

2016-02-18 [1067]

人ELISA試劑盒的17種操作技巧你知道多少適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
  那么它人ELISA試劑盒有哪些操作技巧呢?今天來告訴您人ELISA試劑盒的17種操作技巧,只要您掌握了這些實驗技巧之后,人ELISA試劑盒實驗入門新手學(xué)起來都會快的多。
  A.加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
  B.合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
  C.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
  D.要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。
為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標(biāo)本較多時,要分批操作。人ELISA試劑盒按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,人ELISA試劑盒不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

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